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    選擇DNA提取試劑盒時,重要的變量可能是你所使用的生物體

    點擊次數:1971 更新時間:2022-03-18
      實驗室工作中,經常會需要用到純化的DNA,這時我們通常需要使用一個DNA提取試劑盒對目的DNA進行分離純化。市面上有很多類型的提取試劑盒,當使用不太熟悉的樣本類型時,選擇合適的盒子是尤為關鍵的。
     

     

      DNA提取試劑盒組分:
      目前大多數DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解,柱純化,洗滌雜質,柱洗脫。然而,不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同。
     
      使用的樣本類型:
      不同的DNA來源有不同的試劑盒,從實驗室培養的細胞,到臨床樣本,土壤樣本,甚至指紋,也有許多專門用于某些應用的試劑盒。例如,土壤中的腐殖酸或血液中的血紅蛋白會污染純化的DNA,從而干擾下游的DNA實驗。當然,也有一些試劑盒會在進行純化步驟之前專門去除這些組分。如果想從PCR或瓊脂糖凝膠中純化DNA,有許多方法可以提高瓊脂糖凝膠純化的回收率。
     
      在選擇DNA提取試劑盒時,重要的變量可能是你所使用的生物體。
      1、細菌:許多試劑盒都有用于細菌DNA分離的不同成分,這些試劑盒之間的主要區別在于細胞是如何被分解的,因為有些細菌比其他細菌更更有挑戰性。例如,形成生物膜的細菌可能比傳統的基于去垢劑的方法需要更強的裂解技術。
      2、動物組織:用于動物組織DNA分離的試劑盒通常具有更溫和的裂解技術,因為大多數動物細胞不像細菌細胞那樣有細胞壁。然而,動物組織DNA提取的挑戰往往在于選擇合適的組織勻漿方法。此外,許多動物DNA純化試劑盒不使用苯酚/氯仿萃取或乙醇作為沉淀步驟,以減少破壞DNA的風險。
      3、植物:當涉及到植物DNA分離時,必須考慮到其他一些因素,需要注意污染物的去除。植物在純化過程中通常含有未分離的糖,因此,洗滌劑選擇性地與DNA結合并從溶液中析出,通常是先將洗滌劑溶解在高濃度的鹽溶液中,然后提取DNA。
      4、血液:由于技術上的許多最新進展,血液DNA分離試劑盒中有多種裂解技術和提取方法可供選擇。從血液中分離出的DNA將在很大程度上決定你使用的裂解和提取的類型。無論應用是什么,一定要選擇一種能夠提供純凈、完整、雙鏈和濃縮DNA的試劑盒,以獲得最佳效果。

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